1、溫(wen)度(du)

　　利(li)用(yong)溫(wen)度(du)進(jin)行滅(mie)菌、消毒(du)或(huo)防(fang)腐(fu)，是zui常(chang)用(yong)而(er)又方便(bian)有效(xiao)的(de)方法。高(gao)溫(wen)可使(shi)微(wei)生(sheng)物(wu)細胞內(nei)的(de)蛋白(bai)質和(he)酶類(lei)發生(sheng)變(bian)性(xing)而失(shi)活，從而起滅(mie)菌作(zuo)用(yong)，低(di)溫(wen)通常(chang)起抑(yi)菌作(zuo)用(yong)。

１）幹(gan)熱滅(mie)菌法(fa):

　　a.灼(zhuo)燒滅(mie)菌法(fa)：利(li)用(yong)火焰(yan)直接(jie)把微生(sheng)物(wu)燒死(si)。此法可靠(kao)，滅(mie)菌迅(xun)速，但(dan)易焚毀物(wu)品，所以(yi)使(shi)用(yong)範圍(wei)有限，只適(shi)合(he)於接(jie)種(zhong)針(zhen)、環、試(shi)管(guan)口及不能(neng)用(yong)的(de)汙染(ran)物品或實驗(yan)動物的(de)屍(shi)體等(deng)的滅(mie)菌。

b.幹熱(re)空氣(qi)滅(mie)菌法(fa)：這(zhe)是實(shi)驗(yan)室中常(chang)用(yong)的(de)壹種(zhong)方法，即(ji)把待滅(mie)菌的(de)物(wu)品均勻地放入(ru)烘箱(xiang)中，升溫(wen)至160°C，恒溫(wen)1小時(shi)即(ji)可。

２）濕(shi)熱(re)滅(mie)菌法(fa):

　　在(zai)同(tong)樣(yang)的溫(wen)度(du)下(xia)，濕(shi)熱滅(mie)菌的(de)效(xiao)果(guo)比(bi)幹熱(re)滅(mie)菌好，這(zhe)是因為壹(yi)方面(mian)細胞內(nei)蛋(dan)白質含(han)水(shui)量(liang)高(gao)，容易變(bian)性(xing)。另(ling)壹方面(mian)高(gao)溫(wen)水(shui)蒸(zheng)汽(qi)對蛋(dan)白質有高(gao)度(du)的(de)穿透(tou)力(li)，從(cong)而(er)加(jia)速蛋白(bai)質變(bian)性(xing)而迅(xun)速死亡(wang)。

a.巴氏消毒(du)法(fa)：有些(xie)食(shi)物會因高(gao)溫(wen)破(po)壞營(ying)養成(cheng)分或(huo)影(ying)響質量(liang)，如牛(niu)奶(nai)、醬(jiang)油、啤酒(jiu)等(deng)，所以(yi)只能(neng)用(yong)較(jiao)低(di)的溫(wen)度(du)來殺(sha)死(si)其中的病(bing)原微(wei)生(sheng)物(wu)，這(zhe)樣(yang)既保持食(shi)物(wu)的營(ying)養和(he)風味，又進(jin)行了(le)消毒(du)，保證(zheng)了(le)食品衛(wei)生(sheng)。該(gai)法壹(yi)般(ban)在(zai)62°C，30分鐘(zhong)既可達到消毒(du)目(mu)的。

　　b.煮沸(fei)消毒(du)法(fa)：直接(jie)將(jiang)要消毒(du)的(de)物品放入(ru)清水中，煮沸(fei)15分鐘(zhong)，即(ji)可殺(sha)死(si)細菌的(de)全部(bu)營(ying)養和(he)部(bu)分芽孢(bao)。若(ruo)在清水中加(jia)入(ru)1%碳(tan)酸鈉(na)或2%的石(shi)炭(tan)酸，則(ze)效(xiao)果(guo)更(geng)好。此(ci)法(fa)適(shi)用(yong)於(yu)註射(she)器(qi)、毛(mao)巾及解(jie)剖用(yong)具(ju)的消毒(du)。

　　c.間(jian)歇(xie)滅(mie)菌法(fa)：上述(shu)兩(liang)種(zhong)方法在常(chang)壓下，只能(neng)起到消毒(du)作(zuo)用(yong)，而(er)很難做(zuo)到*無菌。若(ruo)采用(yong)間(jian)歇(xie)滅(mie)菌的(de)方法，就(jiu)能(neng)殺(sha)滅(mie)物(wu)品中所有的(de)微(wei)生(sheng)物(wu)。具(ju)體做(zuo)法是(shi)：將(jiang)待滅(mie)菌的(de)物(wu)品加(jia)熱至100°C，15~30分鐘(zhong)，殺(sha)死(si)其中的營(ying)養體(ti)。然後冷(leng)卻(que)，放入(ru)37°C恒溫(wen)箱(xiang)中過(guo)夜，讓(rang)殘(can)留(liu)的(de)芽孢(bao)萌(meng)發成(cheng)營(ying)養體(ti)。第(di)2天(tian)再(zai)重復上述(shu)步(bu)驟(zhou)，三次左右(you)，就(jiu)可達到滅(mie)菌的(de)目(mu)的。此(ci)法不需(xu)加(jia)壓滅(mie)菌鍋，適(shi)於推(tui)廣(guang)，但(dan)操作(zuo)麻煩，所需(xu)時間(jian)長(chang)。

　　d.加(jia)壓蒸汽滅(mie)菌法(fa)：這(zhe)是發酵工業、醫療保健、食(shi)品檢(jian)測(ce)和(he)微生(sheng)物(wu)學實(shi)驗(yan)室中zui常(chang)用(yong)的(de)壹種(zhong)滅(mie)菌方法。它適(shi)用(yong)於(yu)各種(zhong)耐熱(re)、體(ti)積大(da)的(de)培(pei)養基(ji)的(de)滅(mie)菌，也適(shi)用(yong)於(yu)玻璃(li)器(qi)皿(min)、工(gong)作(zuo)服等(deng)物品的滅(mie)菌。

　　加(jia)壓蒸汽滅(mie)菌是(shi)把待滅(mie)菌的(de)物(wu)品放在壹(yi)個可密(mi)閉的(de)加(jia)壓蒸汽滅(mie)菌鍋中進行的，以(yi)大(da)量(liang)蒸(zheng)汽(qi)使(shi)其中壓力(li)升(sheng)高(gao)。由(you)於蒸(zheng)汽壓的上升(sheng)，水的(de)沸(fei)點(dian)也隨(sui)之提高(gao)。在(zai)蒸(zheng)汽(qi)壓達到1.055公斤(jin)/厘米2時，加(jia)壓蒸汽滅(mie)菌鍋內(nei)的(de)溫(wen)度(du)可達到121°C。在這(zhe)種(zhong)情況(kuang)下，微(wei)生(sheng)物(wu)（包括芽孢(bao)）在15~20分鐘(zhong)便(bian)會(hui)被殺(sha)死(si)，而(er)達到滅(mie)菌目(mu)的。如滅(mie)菌的(de)對象(xiang)是砂(sha)土(tu)、石(shi)蠟(la)油等(deng)面(mian)積(ji)大(da)、含(han)菌多(duo)、傳(chuan)熱差(cha)的物品，則(ze)應(ying)適(shi)當延(yan)長滅(mie)菌時(shi)間(jian)。

　　在(zai)加(jia)壓蒸汽滅(mie)菌中，要引(yin)起註(zhu)意的(de)壹個問(wen)題是(shi)，在恒壓之前(qian)，壹定(ding)要排(pai)盡滅(mie)菌鍋中的冷(leng)空(kong)氣(qi)，否(fou)則(ze)表(biao)上的(de)蒸汽(qi)壓與蒸汽溫(wen)度(du)之間(jian)不具(ju)對應(ying)關系(xi)，這(zhe)樣(yang)會大大降(jiang)低(di)滅(mie)菌效(xiao)果(guo)。

３）影(ying)響滅(mie)菌的(de)因素(su)

　　a.不同(tong)的微生(sheng)物(wu)或同(tong)種(zhong)微生(sheng)物(wu)的不同(tong)菌齡對高(gao)溫(wen)的(de)敏(min)感(gan)性(xing)不同(tong)。多(duo)數微(wei)生(sheng)物(wu)的營(ying)養體(ti)和病(bing)毒(du)在(zai)50~65°C，10分鐘(zhong)就(jiu)會(hui)被殺(sha)死(si)；但(dan)各種(zhong)孢(bao)子、特(te)別(bie)是(shi)芽孢(bao)zui能(neng)抗(kang)熱，其中抗(kang)熱性(xing)zui強的是(shi)嗜(shi)熱脂(zhi)肪芽孢(bao)桿(gan)菌，要在(zai)121°C，12分鐘(zhong)才被(bei)殺(sha)死(si)。對同(tong)種(zhong)微生(sheng)物(wu)來講，幼齡菌比(bi)老齡菌對熱(re)更敏(min)感。

　　b.微生(sheng)物(wu)的數(shu)量(liang)多(duo)少(shao)顯然會影(ying)響滅(mie)菌的(de)效(xiao)果(guo)，數(shu)量(liang)越多(duo)，熱死(si)時(shi)間(jian)越長。

　　c.培(pei)養基(ji)的(de)成(cheng)分與(yu)組成也會影(ying)響滅(mie)菌效(xiao)果(guo)。壹(yi)般(ban)地講，蛋白質、糖(tang)或(huo)脂(zhi)肪(fang)存(cun)在(zai)，則(ze)提(ti)高(gao)抗(kang)熱性(xing)，pH在7附(fu)近，抗(kang)熱性(xing)zui強，偏向(xiang)兩(liang)極(ji)，則(ze)抗(kang)熱能(neng)力(li)下(xia)降(jiang)，而不同(tong)的鹽類(lei)可能(neng)對滅(mie)菌產(chan)生(sheng)不同(tong)的影(ying)響；固體(ti)培(pei)養基(ji)要比(bi)液體培(pei)養基(ji)滅(mie)菌時(shi)間(jian)長(chang)。

４）滅(mie)菌對培(pei)養基(ji)成(cheng)分(fen)的影(ying)響

　　a.pH值普遍下(xia)降(jiang)。

　　b.產(chan)生(sheng)混濁或(huo)沈(chen)澱(dian)，這(zhe)主要是(shi)由(you)於壹(yi)些離(li)子(zi)發生(sheng)化(hua)學反應而產(chan)生(sheng)混濁或(huo)沈(chen)澱(dian)。例如Ca+2與PO4-3化合(he)，就(jiu)會(hui)產(chan)生(sheng)磷(lin)酸鈣(gai)沈(chen)澱(dian)。

　　c.不少(shao)培(pei)養基(ji)顏(yan)色加(jia)深(shen)。

　　d.體積(ji)和濃度有所變(bian)化。

　　e.營(ying)養成(cheng)分有時(shi)受(shou)到破壞。

２、輻射(she)

　　利(li)用(yong)輻(fu)射(she)進(jin)行滅(mie)菌消毒(du)，可以(yi)避(bi)免高(gao)溫(wen)滅(mie)菌或(huo)化(hua)學藥(yao)劑消毒(du)的(de)缺(que)點，所以(yi)應用(yong)越來越廣(guang)，目(mu)前(qian)主要應(ying)用(yong)在(zai)以下幾(ji)個方面(mian)：

　　１）接(jie)種(zhong)室、手術室、食品、藥(yao)物包(bao)裝室常(chang)應用(yong)紫(zi)外線殺(sha)菌。

　　２）應(ying)用(yong)β射(she)線(xian)作(zuo)食品表(biao)面(mian)殺(sha)菌，γ射(she)線(xian)用(yong)於(yu)食品內(nei)部(bu)殺(sha)菌。經輻射(she)後(hou)的食品，因大量(liang)微(wei)生(sheng)物(wu)被殺(sha)滅(mie)，再(zai)用(yong)冷(leng)凍(dong)保藏，可使(shi)保存(cun)期(qi)延(yan)長(chang)。

３、過(guo)濾

　　采(cai)用(yong)機(ji)械(xie)方法，設計壹(yi)種(zhong)濾孔(kong)比(bi)細菌還(hai)小(xiao)的篩(shai)子，做(zuo)成(cheng)各(ge)種(zhong)過(guo)濾器(qi)。通過(guo)過(guo)濾，只讓(rang)液體培(pei)養基(ji)從(cong)篩(shai)子中流下(xia)，而把各種(zhong)微生(sheng)物(wu)菌體(ti)留(liu)在(zai)篩(shai)子上面(mian)，從(cong)而(er)達到除菌的(de)目(mu)的。這(zhe)種(zhong)滅(mie)菌方法適(shi)用(yong)於(yu)壹些對熱(re)不穩(wen)定(ding)的體積小的(de)液體培(pei)養基(ji)的(de)滅(mie)菌以(yi)及氣(qi)體(ti)的(de)滅(mie)菌。它的zui大(da)優(you)點是(shi)不破(po)壞培(pei)養基(ji)中各種(zhong)物質的(de)化學成(cheng)分(fen)。但(dan)是比(bi)細菌還(hai)小(xiao)的病(bing)毒(du)仍(reng)然能(neng)留(liu)在(zai)液體培(pei)養基(ji)內(nei)，有時(shi)會(hui)給實驗(yan)帶來壹(yi)定的(de)麻煩。